vlambda博客
学习文章列表

了解自身免疫性溶血性贫血（AIHA）/Evans综合征（ES）患者外周血CD4+CD69+T细胞的临床意义。方法选取2015年10月至2016年5月于天津医科大学总医院血液科住院的AIHA/ES患者32例，其中溶血发作组15例，缓解组17例；健康对照13名。以流式细胞仪检测外周血CD69+T细胞；实时定量PCR检测外周血CD4+T细胞中CD69 mRNA表达水平；酶联免疫吸附试验（ELISA）检测血浆CD69浓度。结果（1）溶血发作组的CD3+CD69+/CD3+ T细胞比例高于缓解组[(3.08±1.48)%比（1.96±1.33)%, P<0.05]和健康对照组[(1.28±0.83)%, P<0.01]；溶血发作组CD3+CD69+T细胞绝对值高于健康对照组[(2.94±1.81)×107/L比（1.48±1.42)×107/L, P<0.05]。（2）溶血发作组CD3+CD4+CD69+/CD3+CD4+ T细胞比例高于缓解组[(2.16±1.56)%比（1.16±0.62)%，P<0.05]及健康对照组[(0.94±0.78)%，P<0.05]；溶血发作组CD3+CD4+CD69+T细胞绝对值高于健康对照组[(1.04±0.98)×107/L比（0.44±0.38)×107/L，P<0.05]。（3）溶血发作组CD3+CD8+CD69+/CD3+CD8+ T细胞比例高于健康对照组[(4.87±2.56)%比（1.83±1.27)%，P<0.01]；但CD3+CD8+CD69+ T细胞绝对值在3组间差异无统计学意义。（4）Pearson相关分析显示，溶血发作组CD3+CD4+CD69+/CD3+CD4+ T细胞比例与血红蛋白浓度呈负相关（P<0.01），与总胆红素以及间接胆红素均呈正相关（P均<0.01），与网织红细胞比例呈正相关（P=0.01）；缓解组CD3+CD4+CD69+/CD3+CD4+ T细胞比例与血红蛋白浓度呈负相关（P<0.05）。（5）溶血发作组CD4+ T细胞中CD69 mRNA的相对表达水平显著高于缓解组（32.26±35.11比6.05±5.87，P<0.05）及健康对照组（1.76±1.85，P<0.01），缓解组高于健康对照组（P<0.05)。（6）溶血发作组患者血浆CD69水平高于健康对照组[(494.21±16.06) ng/L比（441.39±104.6) ng/L，P<0.05]。结论AIHA/ES患者外周血CD69+ T细胞比例增高，以CD4+CD69+ T细胞增高为主，且与AIHA/ES的疾病严重程度相关。

目的研究类风湿关节炎（RA）患者血清神经轴突导向分子Semaphorin 5A（Sema 5A）表达及其对小鼠巨噬细胞系RAW264.7细胞向破骨细胞分化的作用。方法（1）选RA患者62例，骨关节炎（OA）患者30例，健康对照者48例，应用酶联免疫吸附（ELISA）法检测所有受试者血清Sema 5A水平。（2）以不同浓度Sema 5A（0、0.5、1、2.5、5 μg/ml）处理小鼠巨噬细胞系RAW264.7细胞，培养7 d后行抗酒石酸酸性磷酸酶（TRAP）染色，采用实时定量聚合酶链反应（PCR）检测TRAP、组织蛋白酶-K、基质金属蛋白酶-9 mRNA表达水平；（3）以5 μg/ml Sema 5A处理小鼠巨噬细胞系RAW264.7细胞7 d，培养基中预先加入薄骨片，显微镜下观察骨吸收陷窝个数。结果（1）RA患者血清Sema 5A水平显著高于健康对照者和OA患者[（5.24±0.59）μg/L比（2.93±0.34）μg/L比（2.68±0.47）μg/L，P<0.05）]；抗环瓜氨酸多肽（CCP）抗体阳性RA患者血清Sema 5A水平显著高于抗CCP抗体阴性者（P< 0.05）。Sema 5A水平与RA患者以C反应蛋白计算的28个关节疾病活动度（DAS28-CRP）、C反应蛋白、临床疾病活动指数（CDAI）、Sharp评分呈正相关（r值分别为0.273、0.519、0.448、0.292，P<0.05）；（2）随着Sema 5A浓度增加，TRAP染色阳性细胞数逐渐增多，5 μg/ml Sema 5A作用最强。Sema 5A能诱导TRAP、组织蛋白酶-K、基质金属蛋白酶-9 mRNA表达上调；（3）与空白比，5 μg/ml Sema 5A骨吸收陷窝数增多。结论RA患者血清Sema 5A水平显著升高，与患者的疾病活动度及骨破坏程度相关。Sema 5A可直接诱导小鼠巨噬细胞系RAW264.7细胞向破骨细胞分化。